Uma grande variedade de substâncias orgânicas exibe atividades biológicas e podem ser empregadas no tratamento de diversas enfermidades. O bioensaio de toxicidade frente à Artemia salina (BTAs) é um teste preliminar que avalia a potencialidade biológica de substâncias químicas. Neste trabalho, utilizou-se o óleo essencial do anis-estrelado, extraído por destilação por arraste a vapor e analisado por CCD e CG. Com a intenção de se isolar o anetol (principal constituinte do óleo), realizou-se uma coluna cromatográfica que isolou uma fração rica em anetol, mas com isômeros como o estragol, que não foram separados nem mesmo depois de uma segunda cromatografia. O BTAs foi realizado, então, com dois substratos: o óleo essencial bruto e a fração rica em anetol. Os resultados demonstraram que o óleo essencial bruto é mais tóxico que a fração rica em anetol frente à Artemia salina, indicando uma maior potencialidade de atividade biológica para o óleo bruto.